Rétinoïdes et drogues d’abus: Implications pour le risque de maladie neurologique dans l’infection de type de virus d’immunodéficience humaine

Rétinoïdes et drogues d’abus: Implications pour le risque de maladie neurologique dans l’infection de type de virus d’immunodéficience humaine

Trente-neuf pour cent des Argentins atteints du syndrome d’immunodéficience acquise ont été infectés par le virus de l’immunodéficience humaine par injection de drogues. Toutefois, ce n’est que lorsque les programmes de réduction des risques ont été créés que des projets de recherche et de sensibilisation ont été élaborés. Mise en œuvre d’une méthodologie rapide d’évaluation et de réponse à la fondation du premier programme d’échange de seringues en Argentine La sensibilisation communautaire est la méthode appropriée pour travailler avec la population appauvrie de Buenos Aires. Séroprévalence et campagnes ciblées de prévention ciblant les UDI et leur sexe les partenaires et les enfants ont été développés Des collaborations entre le gouvernement et des organisations non gouvernementales dans diverses villes ont soutenu la distribution de messages de prévention et de réduction des risques aux UDI sur une période d’un mois. Recherche en cours, interventions communautaires et travail collaboratif parmi différentes organisations permettent un contact plus fréquent et plus cohérent avec la population d’UDI de l’Argentine

La maladie neurologique survient chez un grand nombre de personnes infectées par le VIH et peut affecter tous les niveaux du système nerveux En général, les anomalies directement liées à l’infection par le VIH se manifestent tardivement après l’apparition d’une immunosuppression significative. Les anomalies, qui peuvent concerner n’importe quelle zone du système nerveux, comprennent la neuropathie périphérique, la myélopathie et la démence VIH. Des études pathologiques ont révélé la présence d’anomalies caractéristiques telles que la perturbation de la barrière hémato-encéphalique, la pâleur diffuse de la substance blanche. , les nodules microgliaux, et les cellules géantes multinucléaires avec la prolifération des astrocytes et la perte neuronale La cause des dommages réels aux tissus du système nerveux semble être liée aux effets des composés neurotoxiques libérés par les cellules macrophages / microgliales, les astrocytes et les cellules endothéliales activées. à la toxicité associée aux protéines du VIH, telles que gp, tat, et nef Parmi les inflammato Les cytokines pro-inflammatoires IFN-γ, TNF-α, IL-β et IL-, l’acide quinolinique, l’oxyde nitrique, le facteur de croissance dérivé des plaquettes et les prostaglandines sont des médiateurs et des produits associés à la neurotoxicité liée au VIH. la production et la libération de chimiokines pro-inflammatoires, y compris la protéine inflammatoire des macrophages MIP-α, MIP-β, RANTES régulée lors de l’activation, exprimée et sécrétée par les lymphocytes T normaux, et la protéine chimioattractive monocytaire MCP-, qui peut promouvoir davantage l’infiltration des phagocytes mononucléaires dans les tissus du système nerveux Les carences en micronutriments surviennent fréquemment chez les personnes infectées par le VIH Au cours de l’infection, la carence en vitamine A du rétinol peut apparaître tôt dans le cadre d’une immunosuppression significative. Chez certaines personnes, la déficience en rétinol peut être associée à une diminution du nombre de lymphocytes CD et des taux de lymphocytes CD / CD , et chez certaines personnes, ces mesures peuvent être Après administration de rétinol Chez les toxicomanes, de faibles taux sériques de rétinol ont été associés à un risque accru de progression vers le sida et une mortalité liée au VIH plus élevée Par conséquent, chez ces personnes, la déficience en rétinol peut avoir des effets néfastes sur l’évolution clinique de l’infection par le VIHL’utilisation de drogues comme facteur de risque de l’infection par le VIH est apparente depuis les premiers jours de l’épidémie Actuellement, la consommation de drogues demeure une cause majeure d’infection et représente un pourcentage disproportionné de cas de SIDA. Les études in vitro démontrent que les agonistes des récepteurs μ peuvent supprimer la fonction immunitaire des lymphocytes et des monocytes et peuvent augmenter la réplication du VIH dans les monocytes et les macrophages infectés [ ,] In vivo, des études neuropathologiques impliquant des patients atteints du SIDA ont révélé des preuves d’encéphalite à VIH plus fréquemment dans le cerveau. Selon les études épidémiologiques, aucune augmentation de la progression de la maladie du système nerveux liée au VIH n’a été observée chez les usagers de drogues par rapport à Hommes homosexuels infectés par le VIH Ces personnes étaient toutefois à un stade précoce de l’infection par le VIH, ce qui a entraîné une faible fréquence d’infection dans les deux groupes à risque.Dans ce rapport, nous présentons des études sur les paramètres du rétinol rétinol bradypnée. protéine de liaison, et la transthyrétine dans une cohorte de consommateurs de drogues infectés par le VIH et examiné les effets possibles de la morphine sur la production de cytokines pro-inflammatoires par des cellules U exposées aux rétinoïdes, une lignée cellulaire mononucléaire humaine

Patients, matériaux et méthodes

Sujets d’étude Des échantillons stockés d’utilisateurs de drogues injectables séropositifs pour le VIH et VIH-séronégatifs qui participaient à l’étude ALIVE sur le SIDA liée aux expériences intraveineuses, une étude d’histoire naturelle de l’infection au VIH chez les utilisateurs de drogues injectables , ont été analysés. les taux de transthyrétine et les taux de transthyrétine ont été mesurés dans chaque échantillon le jour de la collecte, et des échantillons supplémentaires de sérum et de plasma ont été traités dans les – h de collecte et conservés à – ° C. Les dosages du rétinol sanguin ont été réalisés par chromatographie liquide à haute performance en phase inverse comme décrit précédemment La carence en vitamine A a été définie comme un taux de rétinol de & lt; Les concentrations de RBP ELISA RBP ont été mesurées dans des échantillons de sang provenant des sujets de l’étude au moyen d’un test ELISA ELISA direct bandes VWR International ont été enrobés de mouton anti-RBP IgG Cortex Biochemicals dilué: dans un tampon de revêtement mmol / L NaCO: NaHCO; Les puits ont ensuite été lavés avec du PBS contenant du Tween Fisher Scientific, bloqués à température ambiante avec du sérum de poulet Gibco BRP dans du PBS, puis incubés avec une dilution de l’échantillon de sang ou avec des dilutions en série de Les plaques ont ensuite été lavées et incubées avec: une dilution de la RBP IgG Dako anti-humaine de lapin conjuguée à de la peroxydase dans du PBS avec du sérum de poulet% pour h à température ambiante. Les puits ont ensuite été lavés, et la couleur a été développée à partir de la réaction de peroxydase et de peroxyde d’hydrogène en présence de tetramethlybenzidine Vector Laboratories La réaction colorée a été arrêtée après min avec M HSO, et l’absorbance a été lue à nm avec un Titertek Multiscan II Labsystems La concentration RBP dans le sang et CSF les échantillons ont été déterminés à partir de parcelles standard générées par l’utilisation des lectures de densité optique pour les échantillons témoinsTransthyretin TTR ELISA Un ELISA indirect a été utilisé pour mesurer les concentrations de TTR dans des échantillons de patients et de contrôle. Des bandelettes de puits ont été enduites d’une: dilution de mouton polyclonal anti-TTR IgG ICN Biomedical dans du tampon de couchage pendant une nuit à ° C puis bloquées à température ambiante avec% de sérumalbumine bovine dans du PBS Control Des échantillons, constitués de dilutions en série de sérum humain purifié TTR Sigma et d’échantillons de sérum ou de plasma dilués: dans du PBS, ont été incubés dans les puits enduits pour h Les puits ont été lavés puis incubés avec une: dilution de lapin anti-TTR IgG Boehringer Mannheim dans du sérum de chèvre% Après h, les puits ont été lavés puis incubés pendant h avec une dilution d’IgG Dako anti-lapin conjugué à de la peroxydase de raifort dans du sérum de chèvre et lavés, et la couleur a été développée comme décrit pour le test RBP. La réaction colorée a été arrêtée après min, et l’absorbance a été lue à nm. La concentration de TTR dans les échantillons a été calculée à partir de tracés standards déterminés au moyen de lectures de densité optique. des échantillons témoins: coloration intracytoplasmique et cytométrie de flux de cellules U Des cultures en triple de cellules U dans des microlitres de milieu RPMI contenant% de sérum bovin fœtal,% de glutamine et% de pénicilline-streptomycine ont été incubées à ° C en% CO. incubé dans un milieu RPMI contenant% de sérum bovin foetal,% de glutamine et% de pénicilline-streptomycine seul ou avec un milieu contenant μg / ml de phytohémagglutinine PHA; ICN Biomedical avec ou sans μmol / L acide all-trans rétinoïque ou μmol / L -cis acide rétinoïque Sigma-Aldrich Avec l’addition de rétinoïde et de PHA au milieu, certaines cultures ont été simultanément exposées à nmol / L sulfate de morphine Sigma-Aldrich Après une incubation -h, les cellules ont été lavées et ensuite perméabilisées avec une solution de Cytoperm / Cytofix contenant du GolgiStop BD-Pharmingen, colorée avec de l’IFN-y conjugué à l’isothiocyanate de fluorescéine humaine et de l’anticorps monoclonal TNF-a conjugué à la phycoérythrine BD-Pharmingen Les échantillons colorés ont été analysés par cytométrie en flux multiparamétrique avec un cytomètre de flux FACScalibur équipé du logiciel CellQuest Becton Dickinson L’instrument a été calibré avec l’utilisation de billes Calibrite Becton Dickinson Les populations cellulaires ont été identifiées sur des points et analysé sur des histogrammes avec des portes réglées sur la base de l’intensité du signal obtenu avec des échantillons non colorés et échantillon Des analyses statistiques Des comparaisons des taux de rétinol, de RBP et de TTR entre les groupes sérologiques ont été effectuées avec le test t de Student, et les corrélations ont été examinées en calculant le coefficient de corrélation produit-moment de Pearson avec le test U de Mann-Whitney Les analyses statistiques ont été réalisées avec le logiciel statistique StatView SAS Institute

Résultats

Mesures du rétinol La figure montre une comparaison des mesures de rétinol, RBP et TTR obtenues chez des sujets VIH-séropositifs et VIH-séronégatifs. Les mesures du rétinol étaient plus faibles chez les sujets séropositifs que chez les sujets séronégatifs. cellules / μL; gamme, – cellules / μL que les sujets séronégatifs médiane, cellules / μL; gamme, – μL; P & lt;

Figure View largeTélécharger Plasma rétinol, RBP et RTT transthyrétine dans des échantillons d’utilisateurs de drogues injectables séronégatives et séropositives pour le VIHFigure View largeTélécharger DiapositivePlasma rétinol, protéines RBP de liaison au rétinol et mesures de transthyrétine TTR dans des échantillons séronégatifs pour le VIH et les utilisateurs de drogues injectables séropositifs pour le VIH. Les niveaux de RBP et de TTR, déterminés par ELISA, étaient plus bas parmi les sujets séropositifs, les panels en haut à droite et en bas; les taux plasmatiques d’albumine étaient également plus faibles parmi les données du groupe infecté par le VIH non montrées. Les mesures du rétinol étaient corrélées avec les deux sujets séropositifs pour le RPB: coefficient de corrélation,, P & lt; ; sujets séronégatifs: coefficient de corrélation,, P = et TTR sujets séropositifs: coefficient de corrélation,, P & lt; ; Mots clés: coefficient de corrélation, P = niveaux Effets de la morphine sur la production de cytokines pro-inflammatoires Avec incubation des cultures de cellules U et exposition simultanée des cellules aux concentrations physiologiques de morphine, des changements minimes ont été observés dans IFN-γ et TNF-α intracellulaire Cependant, lorsque les cellules étaient également exposées à l’acide tout-trans rétinoïque ou à l’acide -cis rétinoïque, il y avait une augmentation de la coloration du TNF-α qui était plus importante pour l’acide rétinoïque tout-trans que -cis l’acide rétinoïque

Figure Vue détailléeDisque de coloration coloration des cellules U par les cellules U pour IFN-γ à gauche et TNF-α à droite et analyse par cytométrie en flux Tracé foncé, cellules incubées sans morphine; traçage léger, cellules incubées avec nmol / L sulfate de morphine; axe x, intensité de fluorescence; axe y, numération cellulaire ATRA, acide tout-trans rétinoïque; PHA, phytohémagglutinine; -cis RA, -cis acide rétinoïqueFigure View largeTélécharger Diapositive intracytoplasmique des cellules U pour IFN-γ à gauche et TNF-α à droite et analyse par cytométrie en flux Tracé foncé, cellules incubées sans morphine; traçage léger, cellules incubées avec nmol / L sulfate de morphine; axe x, intensité de fluorescence; axe y, numération cellulaire ATRA, acide tout-trans rétinoïque; PHA, phytohémagglutinine; -cis RA, -cis rétinoïque

Discussion

absorption alimentaire et mauvaise absorption intestinale En effet, les membres de la cohorte étudiée ont suivi des régimes alimentaires contenant moins que la teneur recommandée en vitamine A . Cependant, les sujets examinés dans cette étude ont également bénéficié de conseils diététiques . Chez les personnes infectées par le VIH, il peut y avoir une augmentation de l’utilisation de la vitamine A Cela peut se produire en association avec une augmentation de la synthèse hépatique des protéines de la phase aiguë et parce que de l’augmentation de la consommation de rétinol par les cellules immunitaires comme le système immunitaire monte des réponses spécifiques et non spécifiques Cette augmentation de la demande métabolique ne peut pas être satisfaite avec la supplémentation vitaminique de routine RBP et TTR sont synthétisés par le foie et par le plexus choroïde dans le SNC. ] Une diminution des taux sanguins de ces protéines peut survenir dans le contexte d’une altération de la fonction hépatique Cependant, même dans des circonstances normales, la RBP t n’est pas lié au rétinol est facilement excrété par filtration glomérulaire , avec excrétion accrue chez les personnes atteintes de sepsis et diminué dans le cadre de l’insuffisance rénale aiguë et chronique Dans l’infection par le VIH, fièvre, infection et autres états hypermétaboliques augmentation du débit sanguin urinaire, qui entraîne une excrétion accrue de RBP et une perte urinaire de rétinol plasmatique Par conséquent, il est possible qu’un cycle se développe dans lequel l’infection par le VIH déclenche des événements qui entraînent une baisse des taux plasmatiques de vitamine A Les effets des modifications du taux de rétinol, de RBP et de TTR dans le sang sur les mesures correspondantes dans le liquide céphalorachidien ne sont pas clairs à ce jour. En ce qui concerne les opioïdes, des études in vitro démontrent que les agonistes des récepteurs μ peuvent inhiber la fonction immunitaire lymphocytaire et monocytaire et peut augmenter la réplication du VIH dans les monocytes et les macrophages infectés En outre, comme indiqué précédemment, l’encéphalite à VIH, qui est une complication de la fin-st Les données épidémiologiques provenant de nombreuses études, cependant, n’ont pas tout à fait été identifiées dans les cerveaux des opioïdes infectés par le VIH que dans les cerveaux des hommes gais , suggérant que les opioïdes pourraient augmenter le taux de progression du VIH. Par exemple, dans les comparaisons de séroconvecteurs du VIH dans l’étude ALIVE avec des séroconverters dans une cohorte de toxicomanes italiens, il n’y avait aucun effet de la race, l’usage d’héroïne seulement contre la polytoxicomanie, Galai et al ont notamment démontré que durant les premières années suivant la séroconversion, les hommes homosexuels avaient des diminutions plus importantes du nombre de cellules CD que les consommateurs de drogues. De plus, d’autres études portant sur la cohorte ALIVE n’ont démontré aucun effet global de l’usage de drogues sur la durée médiane du VIH. nfection avant le début du SIDA ou sur la progression de l’infection au VIH mesurée par des marqueurs de maladie tels que CD, néoptérine, β-microglobuline et IgA sériques totales Les schémas d’usage de drogues signalés, y compris les épisodes de sevrage ou de surdose Cette observation contraste avec l’information tirée d’études sur des animaux, dans lesquelles une dose chronique stable d’opioïde semble protéger contre une maladie rétrovirale progressive, et une dose intermittente d’opioïdes, qui représente des épisodes aigus de sevrage aux opioïdes, a été associée. Les complications neurologiques de l’infection par le VIH semblent être liées à des mécanismes impliquant une régulation positive des réponses immunitaires pro-inflammatoires Les composés rétinoïdes peuvent supprimer la production de cytokines et de chimiokines pro-inflammatoires, effets qui peuvent être bénéfiques pour les personnes atteintes Inflammation du SNC secondaire à l’infection par le VIH Études in vitro sur les effets des rétinoïdes sur le système immunitaire Dans nos études, la morphine, l’acide tout-trans rétinoïque, l’acide cis-rétinoïque et le PHA ont été ajoutés simultanément aux cultures, ce qui pourrait simuler des réponses obtenues avec l’initiation de la vitamine. Un traitement chez les personnes infectées par le VIH Ces études doivent être suivies d’études sur les effets de ces agents à différents moments, concentrations et durées d’exposition, ainsi que sur leurs effets sur les cellules différenciées et sur les études réalisées in vivo. On ne peut s’attendre à ce que les effets observés dans des systèmes in vitro isolés modélisent précisément les nombreux facteurs qui influent sur les résultats des études épidémiologiques. Néanmoins, cette information pourrait s’avérer utile pour élucider les effets spécifiques des drogues sur l’immunomodulation induite par les rétinoïdes et l’utilité potentielle des médicaments. composés de rétinoïdes dans le traitement de la maladie neurologique liée à l’infection par le VIH n

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