Association de la réponse immunitaire au facteur de croissance des cellules endothéliales avec des manifestations tardives et tardives de la maladie de Lyme, mais pas de post-traitement Syndrome de la maladie de Lyme

Association de la réponse immunitaire au facteur de croissance des cellules endothéliales avec des manifestations tardives et tardives de la maladie de Lyme, mais pas de post-traitement Syndrome de la maladie de Lyme

Le facteur de croissance des cellules endothéliales a été récemment proposé comme un auto-antigène potentiel dans les manifestations de la maladie de Lyme qui impliqueraient des mécanismes immunitaires lire. Nos résultats indiquent qu’une réponse immunitaire humorale à cette protéine n’est pas associée au syndrome de Lyme après le traitement.

Maladie de Lyme, post-traitement Syndrome de la maladie de Lyme, facteur de croissance des cellules endothéliales, anticorps, Borrelia burgdorferiLyme est l’infection vectorielle la plus répandue en Amérique du Nord et en Europe Causée par les spirochètes du complexe Borrelia burgdorferi, multisystémique et souvent décrite comme se produisant par étapes: maladie précoce localisée, précoce et disséminée Bien que l’antibiothérapie résout les symptômes cliniques dans la majorité des cas, environ% des patients atteints d’arthrite de Lyme, manifestation tardive, continuent d’avoir une inflammation articulaire persistante malgré une antibiothérapie L’arthrite de Lyme réfractaire aux antibiotiques répond souvent à des agents immunomodulateurs ou anti-inflammatoires Distincts de l’arthrite de Lyme résistante aux antibiotiques, certains patients présentent des symptômes persistants de douleur, fatigue et / ou difficultés de concentration et de mémoire après un traitement antibiotique standard. absence de preuve de l’infection en cours, déterminée avec cu Plusieurs méthodes disponibles Cette condition, appelée syndrome de Lyme post-traitement PTLDS, peut être associée à une altération considérable de la qualité de vie liée à la santé Bien que des mécanismes immunitaires soient soupçonnés, aucun biomarqueur diagnostique ou traitement efficace n’est disponible pour PTLDSIn. , facteur de croissance des cellules endothéliales ECGF a été identifié comme une cible autoantigène des réponses des cellules T et B chez les patients atteints de la maladie de Lyme, en particulier ceux atteints d’arthrite réfractaire aux antibiotiques Dans une étude de suivi chez des patients européens atteints de la maladie de Lyme, ont signalé que la réactivité des anticorps à l’ECGF est plus fréquente chez les personnes qui présentent plus tard des symptômes post-traitement que chez les autres . Cependant, l’étude n’indiquait pas si les taux d’anticorps anti-ECGF étaient élevés chez ces patients. de l’auto-immunité à ECGF dans PTLDS apporterait le plus fort soutien encore pour l’implication des mécanismes à médiation immunitaire dans thi s condition, offrir un biomarqueur potentiellement utile pour identifier les patients affectés et / ou ceux à plus grand risque de développer la condition, et éventuellement ouvrir de nouvelles avenues pour le traitement

Méthodes

Patients et contrôles

Des échantillons de sérum de personnes atteintes de PTLDS ont été obtenus dans le cadre d’une étude clinique antérieure . D’autres échantillons de sérum ont été prélevés auprès de l’Institut national des allergies et des maladies infectieuses. passer en revue les protocoles approuvés par le conseil d’administration Les échantillons de sérum ont été conservés à – ° C. Cette étude a été approuvée par l’Institutional Review Board du Columbia University Medical Center.Les échantillons de sérum provenaient de personnes atteintes de PTLDS femelle; moyenne [écart type SD] âge, années; temps moyen écoulé depuis le diagnostic original de la maladie de Lyme, années La source des échantillons et la définition des cas de PTLDS ont été décrites ailleurs en détail L’inclusion de ces spécimens spécifiques de la cohorte initiale était basée sur la disponibilité. Ces patients avaient des antécédents d’érythème migrant EM Quarante-six patients étaient séropositifs avec un dosage immuno-enzymatique commercial ELISA pour les anticorps IgG anti-immunoglobuline G contre le lysat de cellules entières B burgdorferi supplémenté avec la protéine recombinante VlsE Euroimmun Des échantillons de sérum témoin ont été prélevés les personnes qui avaient des antécédents de maladie de Lyme, mais aucun symptôme de post-traitement résiduel à ≥ l’année de suivi des femmes; âge moyen [SD], années; temps moyen écoulé depuis le diagnostic initial de la maladie de Lyme, années; ces sujets sont appelés post-traitement de la maladie de Lyme PTLDH sain de ceux-ci, étaient ELISA séropositifs pour IgG à B lysat burgdorferi complété avec VlsE Tous avaient rencontré des critères de surveillance pour la maladie de Lyme au moment du diagnostic initial , y compris ceux qui ont présenté un EM Le temps écoulé entre le diagnostic de la maladie de Lyme et la collecte de spécimens de sérum était limité à des années et des années pour les cohortes PTLDS et PTLDH. âge moyen [SD], années avec une gamme de manifestations de la maladie de Lyme de début à la fin, y compris EM unique n =, EM multiples n =, neurologique précoce n =, n neurologique tardif n =, et l’arthrite n = Ces échantillons de sérum étaient Les patients répondaient aux critères de surveillance des Centers for Disease Control and Prevention pour le diagnostic de la maladie de Lyme , et étaient ELISA séropositifs pour IgG au lysat B burgdorferi supplémenté avec VlsE En outre, des échantillons de sérum de sujets sains femmes; âge [SD] moyen, années sans signes cliniques ou sérologiques de maladie de Lyme passée ou présente ont été inclus comme témoins

Réactivité des anticorps à l’ECGF

Les IgG sériques à ECGF ont été mesurées par ELISA comme décrit ailleurs , avec les modifications suivantes. Les plaques ont été incubées avec une solution de μg / mL de systèmes ECGF R & D humains recombinants sans support pour obtenir un enrobage optimal. :, qui s’est avéré optimal pour obtenir des résultats d’absorbance dans la gamme linéaire La densité optique a été mesurée à nm.

L’analyse des données

Les différences de groupe ont été analysées par l’analyse de variance avec des tests post hoc. L’ajustement pour l’effet covariable dans toutes les comparaisons a été effectué avec l’analyse de covariance, en utilisant le modèle linéaire général. Les seuils de positivité pour les données ELISA ont été assignés comme écarts-types sans preuve de la maladie de Lyme antérieure Toutes les valeurs de P ont été mises en évidence, et les différences ont été considérées statistiquement significatives à P & lt; Les analyses statistiques ont été réalisées avec les logiciels Prism GraphPad et Minitab Minitab

RÉSULTATS

Il n’y avait pas de différences statistiquement significatives dans le sexe, l’âge, le temps écoulé depuis le diagnostic original de la maladie de Lyme, l’histoire de la SE ou la séropositivité pour les anticorps anti-B burgdorferi entre les cohortes PTLDS et PTLDH. Par rapport aux témoins sains, la cohorte de la maladie de Lyme active présentait un niveau de DO significativement plus élevé et une fréquence de réactivité des anticorps à l’ECGF dans P & lt; Figure A En particulier, par rapport à la cohorte en bonne santé, il y avait un niveau et une fréquence de réponse d’anticorps significativement plus élevés dans les multiples EM P & lt; , neurologique précoce P & lt; , neurologique tardif P & lt; et l’arthrite P & lt; groupes B, mais pas dans le groupe EM unique. Figure B Il n’y avait pas de différences significatives entre les multiples groupes EM, neurologiques précoces, neurologiques tardifs et arthrites

Figure View largeTélécharger la réactivité du corps au facteur de croissance des cellules endothéliales ECGF A, niveau et fréquence de la réactivité de l’immunoglobuline G IgG à l’ECGF, déterminée par ELISA immuno-enzymatique, chez des témoins sains sans antécédents ou preuves sérologiques de maladie de Lyme antérieure. avec une gamme de manifestations précoces à tardives de la maladie de Lyme active n =, post-traitement maladie de Lyme individus PTLDH en bonne santé n =, et patients avec post-traitement syndrome de la maladie de Lyme PTLDS n = barres horizontales indiquent la moyenne pour chaque groupe; section grise, zone dans les écarts-types de la moyenne pour le groupe témoin sain, au-dessus duquel les valeurs sont considérées positives Comparativement aux témoins sains, la cohorte de la maladie de Lyme active présentait un niveau et une fréquence significativement plus élevés de réactivité aux anticorps ECGF P & lt; Par rapport au groupe de la maladie de Lyme active, le niveau et la fréquence de la réactivité des anticorps à l’ECGF étaient significativement plus faibles dans les deux groupes de la maladie de Lyme post-traitement PTLDS et PTLDH P & lt; pour chacune Il n’y avait pas de différence significative dans la réactivité des anticorps anti-ECGF entre les cohortes PTLDS et PTLDH P & gt; B, niveau et fréquence de la réactivité IgG à ECGF chez les témoins sains n = et dans les sous-groupes de patients atteints de la maladie de Lyme active, représentant les manifestations précoces à tardives de la maladie de Lyme, y compris érythème migrant simple EM n =, EM multiples =, neurologique précoce =, neurologique tardif n =, et arthrite n = Comparativement à la cohorte en bonne santé, il y avait un niveau significativement plus élevé et la fréquence de la réponse des anticorps dans les multiples EM P & lt; , neurologique précoce P & lt; , neurologique tardif P & lt; et l’arthrite P & lt; groupes, mais pas le groupe EM unique Il n’y avait pas de différences significatives entre les multiples groupes EM, neurologiques précoces, neurologiques tardifs et arthrite Abréviation: OD, densité optique a été mesurée à nmFigure View largeTélécharger la réactivité des anticorps au facteur de croissance des cellules endothéliales ECGF A, niveau et fréquence de la réactivité de l’immunoglobuline G IgG à l’ECGF, déterminée par ELISA immuno-enzymatique, chez des témoins sains sans antécédents ou preuves sérologiques de maladie de Lyme antérieure n =, patients présentant une gamme de manifestations de la maladie de Lyme active précoce ou tardive n =, post-traitement Maladie de Lyme individus PTLDH en bonne santé n =, et patients avec post-traitement Syndrome de la maladie de Lyme PTLDS n = Les barres horizontales indiquent la moyenne pour chaque groupe; section grise, zone dans les écarts-types de la moyenne pour le groupe témoin sain, au-dessus duquel les valeurs sont considérées positives Comparativement aux témoins sains, la cohorte de la maladie de Lyme active présentait un niveau et une fréquence significativement plus élevés de réactivité aux anticorps ECGF P & lt; Par rapport au groupe de la maladie de Lyme active, le niveau et la fréquence de la réactivité des anticorps à l’ECGF étaient significativement plus faibles dans les deux groupes de la maladie de Lyme post-traitement PTLDS et PTLDH P & lt; pour chacune Il n’y avait pas de différence significative dans la réactivité des anticorps anti-ECGF entre les cohortes PTLDS et PTLDH P & gt; B, niveau et fréquence de la réactivité IgG à ECGF chez les témoins sains n = et dans les sous-groupes de patients atteints de la maladie de Lyme active, représentant les manifestations précoces à tardives de la maladie de Lyme, y compris érythème migrant simple EM n =, EM multiples =, neurologique précoce =, neurologique tardif n =, et arthrite n = Comparativement à la cohorte en bonne santé, il y avait un niveau significativement plus élevé et la fréquence de la réponse des anticorps dans les multiples EM P & lt; , neurologique précoce P & lt; , neurologique tardif P & lt; et l’arthrite P & lt; Groupes, mais pas le seul groupe EM Il n’y avait pas de différences significatives entre les multiples groupes EM, neurologiques précoces, neurologiques tardifs et arthritiques Abréviation: OD, la densité optique a été mesurée à nmComparé avec le groupe de la maladie de Lyme active, le niveau et la fréquence de à ECGF était significativement plus faible dans les deux groupes de la maladie de Lyme après le traitement PTLDS et PTLDH P & lt; De plus, il n’y avait pas de différence significative dans le niveau ou la fréquence de la réactivité des anticorps anti-ECGF entre les groupes PTLDS et PTLDH. Figure A En outre, les différences dans le niveau et la fréquence de la réactivité des anticorps à l’ECGF PTLDS ou la cohorte PTLDH et le groupe de contrôles sains n’étaient pas statistiquement significatifs Dans la cohorte de la maladie de Lyme active, la réponse anticorps anti-ECGF était plus grande chez les individus séropositifs pour les anticorps anti-B burgdorferi que chez ceux qui étaient séronégatifs. Il n’y avait pas de différence significative dans la réponse anticorps anti-ECGF entre les sujets séropositifs et séronégatifs dans l’un des groupes de la maladie de Lyme après le traitement.

DISCUSSION

Les résultats de cette étude confirment l’existence d’une réactivité immunitaire à l’autoantigène ECGF chez des patients atteints de la maladie de Lyme . Cependant, en utilisant des cohortes relativement importantes de patients et de témoins bien caractérisés, nous n’avons trouvé aucune preuve indiquant une réactivité immunitaire humorale. à ECGF est plus élevé chez les patients ayant des antécédents de maladie de Lyme et des symptômes persistants que chez ceux sans symptômes résiduels, contrairement à ce qui a été suggéré dans une étude antérieure Bien que les résultats ne tiennent pas compte des patients atteints de la maladie de Lyme les anticorps sont plus susceptibles de développer des PTLDS, nos données indiquent que la réactivité immunitaire à l’ECGF est peu susceptible de jouer un rôle dans la persistance des symptômes après un traitement antibiotique et que l’évaluation de la réponse anticorps à l’ECGF ne serait pas utile pour l’identification des individus. éprouve actuellement ces symptômes. Il a été noté ailleurs que la présence des réponses des cellules T et B à l’ECGF, la réactivité des lymphocytes T à de multiples épitopes a fourni des preuves contre la possibilité d’anticorps anti-B burgdorferi croisés comme source des anticorps détectés contre l’ECGF De plus, il n’y a pas de protéine connue dans le protéome B burgdorferi À l’étude actuelle, nous n’avons pas observé d’association significative entre la réactivité élevée des anticorps à l’ECGF et la séropositivité pour l’anticorps anti-B burgdorferi chez les personnes atteintes de PTLDS ou de PTLDH, même si plus de la moitié restait séropositive pour les anticorps anti-Borrelia. une preuve supplémentaire que la réactivité croisée de la réponse immunitaire aux protéines de B burgdorferi est peu susceptible d’expliquer la présence d’anticorps contre l’ECGF dans le contexte de la maladie de Lyme, bien que notre évaluation porte uniquement sur les protéines exprimées par les spirochètes cultivés in vitro et VlsE. composé le mélange antigénique dans les immunodosages utilisés Nos résultats suggèrent également que la réponse immunitaire humorale e à l’ECGF dépend étroitement de la présence d’une infection continue par B burgdorferi et diminue rapidement après un traitement antibiotique dans la plupart des cas, bien que des données longitudinales de patients individuels qui subissent un traitement soient nécessaires pour confirmer cette

Remarques

Remerciements Ce travail implique l’utilisation de spécimens provenant d’un contrat-dépôt pris en charge la santé Instituts nationaux de la N-AI- Nous remercions Siu Ping-Turk, Carla Williams, Doreen Garabedian, Diane Holmgren, Donna McKenna, et Susan Bittker pour leur aide avec l’échantillon Le financement n’a pas joué de rôle dans la conception des études, la collecte et l’analyse des données, la décision de publier ou la préparation du manuscrit. Soutien financier Ce travail a été soutenu par l’Institut national des allergies et des maladies infectieuses. AA, et le Programme de recherche intra-muros du NIAID AR MPotential conflits d’intérêts GPW rapports recevant des subventions de recherche d’Immunetics, Rarecyte, Institut de biologie des systèmes, et bioMérieux; il possède l’équité dans Abbott, a été un témoin expert en cas de faute professionnelle impliquant la maladie de Lyme et la babésiose, est membre du conseil d’administration non rémunéré de la Fondation des maladies de Lyme américaine, et a été consultant auprès de Baxter pour ARM de développement de vaccin contre la maladie de Lyme est une co-inventeur sur un US brevet en utilisant le test des systèmes d’immunoprécipitation luciférase pour établir le profil des réponses d’anticorps à un panel de protéines B burgdorferi rapports AA qui reçoivent des subventions des Instituts nationaux de la santé et l’Alliance de recherche Lyme pour la recherche liée à la maladie de Lyme Tous les autres auteurs rapportent pas les auteurs potentiels de conflictsAll ont soumis la Formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Les conflits que les éditeurs jugent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués

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