Neisseria meningitidis transport lors d’une flambée de maladie du sérogroupe C

Neisseria meningitidis transport lors d’une flambée de maladie du sérogroupe C

Pendant une épidémie de méningococcie du sérogroupe C, on a vacciné des individus âgés d ‘un an à Abbotsford, Colombie Britannique. Cette étude porte sur la répartition du portage de Neisseria meningitidis dans cette population et les implications de cette distribution pour le ciblage de la campagne de vaccination. Les colonies ont été identifiées et sérogroupées en utilisant des méthodes d’agglutination standard et par PCR Les isolats ont été caractérisés en utilisant l’électrophorèse sur gel à champ pulsé PFGE La prévalence de portage de N meningitidis était des porteurs par sujets%; % d’intervalle de confiance,% -% Seulement un% des isolats de ces supports se sont avérés être du sérogroupe C par agglutination ou par PCR, et tous provenaient d’individus appartenant au groupe d’âge ciblé pour la vaccination. Seul l’isolat a été trouvé L’observation selon laquelle une souche virulente ne circule pas largement suggère la possibilité d’une faible immunité de base dans la population à risque et souligne l’importance de la vaccination dans la lutte contre la méningococcie du groupe C épidémique

De décembre à mars, des cas de méningococcie invasive du sérogroupe C ont été identifiés à Abbotsford, en Colombie-Britannique, au Canada. Abbotsford est une population de centre agricole située à km à l’est de Vancouver, dans la vallée du Fraser. individu était dans la population du groupe d’âge,,; l’incidence par âge au cours de cette période était de 1 cas par personne. Un cinquième cas dans ce groupe d’âge a entraîné un deuxième décès au début d’avril, au cours duquel une intervention de santé publique a été mobilisée

Vue de la table grandTélécharger la diapositiveCaractéristiques des cas de méningococcie invasive chez les résidents d’Abbotsford, Colombie-Britannique, CanadaTable View largeTélécharger slideCaractéristiques des cas de méningococcie invasive chez les résidents d’Abbotsford, Colombie-Britannique, CanadaCette réponse de santé publique était une stratégie de vaccination ciblant les personnes âgées. le ciblage était guidé par la répartition par âge observée parmi les premiers cas, mais aussi par l’opportunité logistique et politique d’inclure tous les élèves du secondaire plutôt qu’un sous-ensemble dans la campagne. à un groupe d’âge auquel la souche de l’éclosion pourrait être transmise à la suite des enseignants qui étaient & gt; Étant donné que les provinces de l’Alberta et du Québec avaient signalé la poursuite de la maladie du groupe C dans certains groupes immunisés avec le vaccin polysaccharidique , le vaccin conjugué contre le méningocoque du groupe C a été utilisé comme Dès que la campagne de la Colombie-Britannique a été disponible, plusieurs questions ont été soulevées. La campagne proposée a-t-elle été ciblée? Le transport de la souche associée à une maladie invasive a-t-il été largement distribué? qui avait des résultats négatifs de culture pour Neisseria meningitidis mais chez qui la maladie avait été diagnostiquée par PCR directe reliée à la flambée. L’objectif principal de cette étude était de mesurer la prévalence du port de N meningitidis dans le groupe ciblé & lt; et & gt; Les objectifs secondaires comprenaient l’identification des corrélats démographiques du portage et l’évaluation de la distribution du sérogroupe d’isolats de N meningitidis par les porteuses et les travailleurs de la scierie dans une région limitrophe d’Abbotsford où un travailleur a développé une maladie invasive du sérogroupe C.

Méthodes

Échantillonnage Le recrutement a eu lieu dans des cliniques de vaccination spéciales avant que chaque personne éligible ne soit vaccinée. Les sujets comprenaient des personnes éligibles au vaccin contre le méningocoque C, des enfants trop jeunes pour être ciblés par les étudiants du programme de vaccination dans les écoles secondaires locales. trop âgés pour être ciblés enseignants dans les lycées éligibles Le recrutement s’adressait aussi aux collègues de l’employé du moulin à bois qui était malade en même temps que la flambée. Après un consentement éclairé, des écouvillonnages pharyngés ont été recueillis et des informations sur l’âge et le sexe Analyse de microbiologie Les spécimens ont été transportés au laboratoire dans le milieu de transport du charbon de Amies et étalés après leur arrivée sur le milieu Thayer Martin. Les colonies ont été identifiées en utilisant la coloration de Gram, l’examen de la morphologie des colonies et les tests biochimiques identifiés comme N meningitidis. sérogroupe au Centre for Disease Co de la Colombie-Britannique On a obtenu des antisérums de Difco Laboratories pour les sérogroupes B et C et du Laboratoire national de microbiologie de Santé Canada, à Winnipeg, au Manitoba, pour les sérogroupes A, E, W, X, Y et Z, et les isolats de sérogroupe C ont été envoyés à National. Les isolats pharyngiens de N meningitidis pour lesquels le sérogroupe n’a pas pu être identifié par le test d’agglutination ont été testés par PCR pour détecter les gènes de biosynthèse capsulaire et ainsi déterminer les souches non exprimant la capsule des sérogroupes A, B, C, W et YA combinaison de méthodes de PCR publiées a été utilisé pour permettre l’identification sans ambiguïté des sérogroupes A, B, C, W et Y L’extrait d’ADN de chaque isolat bactérien a été faite en utilisant le protocole Instagene BioRad [ ] Les amorces, les réactifs et les conditions de cyclage étaient tels que décrits ailleurs , sauf dans les cas suivants: Le tampon avait un concentré final a été complété avec de l’ADN polymérase U de Taq Invitrogen Canada Pour le premier protocole , les conditions de cyclage de la PCR ont été modifiées en ° C pour le cycle min, ° C pour min et ° C pour cycles min, et cycle d’extension final de ° C pour min Toutes les amplifications PCR ont été réalisées dans un Robocycler Stratagene Les dosages de produits PCR étaient basés sur la visualisation de μL de l’échantillon amplifié sur un% bromure d’éthidium- gel d’agarose coloré après électrophorèse Des contrôles bactériens positifs pour les sérogroupes respectifs et un témoin négatif ont été amplifiés et analysés simultanément. Chaque isolat a été testé pour l’amplification du gène de la chaperonine , pour confirmer qu’il n’y avait pas de résultats de PCR faussement négatifs. Extraits d’ADNPFGE Les isolats provenant de cas invasifs et d’isolats de la gorge qui ont été déterminés comme étant du sérogroupe C par le test d’agglutination ou la PCR ont été soumis au PFGE. En bref, nous avons utilisé une méthode décrite par le Laboratoire national de microbiologie, sauf que les cellules ont été traitées avec du formol PFGE modèles ont été évalués pour la parenté en utilisant des critères établis par Tenover et al Une description détaillée des méthodes peut être trouvée dans une annexe technique disponible à partir DMPS analyse statistique Les IC% ont été estimés en utilisant la méthode binomiale exacte L’évaluation des facteurs de risque a été effectuée en utilisant le test apparié de MacNemar for pour les variables dichotomiques et un test de Student apparié pour les variables continues La régression logistique conditionnelle a été utilisée pour déterminer quelles variables étaient indépendamment associées au transport de N meningitidis. impliqué l’évaluation des interactions de premier ordre

Résultats

Les écouvillonnages pharyngés ont été obtenus chez des sujets dont les sujets étaient âgés ou plus jeunes que la tranche d’âge ciblée. La prévalence globale du portage de N meningitidis était de 60% par sujet%; % CI,% -% La répartition du transport selon l’âge, le sexe et la ville de résidence dans les groupes de sujets qui étaient éligibles et non éligibles à la vaccination est indiquée dans le tableau Le taux de portage de N meningitidis était significativement plus élevé chez les hommes et sujets du groupe d’âge ciblé par le vaccin De façon inattendue, le taux de portage était plus faible chez les résidents d’Abbotsford, où l’épidémie de méningococcie du groupe C était concentrée, que chez les résidents des municipalités avoisinantes. étaient le sexe masculin, la non – résidence à Abbottsford, et l ‘âge – ans le groupe d’ âge ciblé par le programme de vaccination.

Tableau View largeTélécharger la diapositivePrévalence du portage de Neisseria meningitidis chez les participants à un programme d’immunisation au CanadaTable View largeTélécharger diapoPrévalence du portage de Neisseria meningitidis chez les participants à un programme d’immunisation au CanadaSerogroupe La distribution des isolats à partir d’écouvillons pharyngés est présentée dans le tableau. positifs pour N meningitidis sérogroupe C Tous les sujets étaient dans le groupe cible immunisation – ans Autres isolats non protéinables étaient non exprimant capsule mais ont été trouvés par PCR pour avoir des gènes biosynthétiques pour sérogroupe C Ces isolats provenaient de sujets dans le même groupe d’âge , bien que des sujets venaient de communautés adjacentes à Abbotsford

DiapositiveDistribution des sérogroupes, tels que déterminés par agglutination et PCR, des isolats de Neisseria meningitidis des écouvillons pharyngésTable View largeTélécharger Répartition des séro-groupes, déterminée par agglutination et PCR, des isolats de Neisseria meningitidis des écouvillons pharyngésFigure A montre les profils PFGE des isolats du sérogroupe C Isolats dans les couloirs – sont identiques Selon les critères de Tenover, l’isolat dans la voie est étroitement lié aux isolats dans les couloirs – les bandes sont différentes et l’isolat dans la coulée peut être apparenté. aux isolats dans les voies – les bandes sont différentes

Figure Vue largeTélécharger les patrons PFGE d’isolats de Neisseria meningitidis du sérogroupe C obtenus à partir d’individus atteints d’une méningococcie invasive impliqués dans une éclosion à Abbotsford, Colombie-Britannique, Canada Les isolats dans les couloirs sont identiques, l’isolat dans le couloir est étroitement apparenté à ceux les bandes isolées sont différentes, et l’isolat dans la voie peut être apparenté aux isolats dans les couloirs – les bandes sont différentes B, profils PFGE des isolats N meningitidis du sérogroupe C identifiés dans une étude de prévalence des porteurs Trois de ces voies, et ont été identifiés par l’agglutination tester; les voies restantes, et ont été identifiées par PCR Seul un isolat provenant d’un employé de l’usine de bois d’une voie de région adjacente était identique à la souche A de l’épidémie. Les isolats dans les couloirs – sont identiques, l’isolat dans la voie est étroitement lié à ces bandes isolées sont différents, et l’isolat dans la voie peut être lié aux isolats dans les couloirs – les bandes sont différentes des profils B, PFGE des isolats de N meningitidis du sérogroupe C identifiés dans une étude de prévalence des porteurs Trois de ces voies, et ont été identifiées par le test d’agglutination; les voies restantes ont été identifiées par PCR. Seul un isolat provenant d’un employé de l’usine de bois d’une région adjacente était identique à la souche A de la flambée. – La figure B montre les profils PFGE des isolats de sérogroupe C identifiés dans l’étude de prévalence des porteurs. Isolats dans ces voies, et ont été identifiés par le test d’agglutination; Selon les critères de Tenover, seul un isolat provenant d’un collègue proche de l’employé de l’usine de bois qui avait une maladie invasive du groupe C de la méningococcie N du méningocoque figure B, la voie était identique à la souche de l’éclosion. A, voies –

Discussion

Un portage du sérogroupe C de type N meningitidis a été trouvé rarement lors d’une intervention pour une éclosion établie. Seulement% des sujets portaient des isolats du groupe C qui étaient détectables par des tests de culture et d’agglutination; Ce résultat est conforme aux études précédentes sur le transport de N meningitidis pendant les épidémies, dans lesquelles la prévalence du transport variait de% à% Dans une étude, le transport de la souche épidémique n’a pas été trouvé dans le groupe d’âge le plus touché, et il n’y avait pas de différence dans le taux de portage de la souche épidémique dans les zones d’incidence élevée et faible Une incapacité similaire à trouver un groupe N meningitidis C a été rapportée dans un comté hypersporidien de Géorgie Plusieurs explications sont possibles. Premièrement, parce que l’étude a été lancée après l’établissement de l’épidémie et la distribution du vaccin, les taux de portage communautaires maximums peuvent avoir précédé l’étude Deuxièmement, certains isolats génétiques du sérogroupe C sont capables de leur expression capsulaire on et off Par ce mécanisme, il est possible que certaines souches du sérogroupe C ne puissent pas être identifiées par des méthodes phénotypiques. Notre utilisation de la PCR pour aider s l’érogroupe a augmenté le nombre d’isolats du sérogroupe C identifiés, mais l’identification de ces isolats était encore très rare Enfin, les prélèvements naso-pharyngiens se sont révélés insensibles, et il est peu probable que les écouvillons pharyngés donnent de meilleurs résultats. Des taux faibles d’immunité protectrice contre les souches virulentes, contribuant à la prédisposition de la population aux épidémies, ont été rapportés. Une faible prévalence du portage d’une souche épidémique de N meningitidis et une faible prévalence de l’immunité protectrice chez une population étudiante ont été associées. L’immunité n’a pas été évaluée dans la présente étude, mais la constatation constante d’un faible taux de portage du sérogroupe C en présence d’une activité accrue de la maladie suggère que la vaccination a particulièrement rôle important dans la prévention de la morbidité résultant de la maladie du sérogroupe C La portée épidémique du sérogroupe C n’a été détectée que dans les groupes d’âge ciblés, mais il était assez rare que le portage ait pu être présent mais non identifié dans d’autres groupes dermatite atopique. Cependant, nos résultats ont prouvé utile pour alerter le personnel de santé publique sur un lien entre un cas apparemment sporadique chez un ouvrier d’une région adjacente et l’éclosion d’Abbotsford. Même si ce patient avait reçu un diagnostic clinique de méningococcie confirmée par PCR directe, l’identification du la souche d’éclosion chez un collègue proche a appuyé un lien avec l’éclosion d’Abbotsford Si d’autres cas s’étaient développés dans ce contexte ou cette communauté, le programme d’immunisation aurait été mis en œuvre plus rapidement à la suite de nos constatations. , et, par conséquent, le transport transitoire n’aurait pas été détecté Certains isolats qui étaient n Les méthodes génétiques ont permis de déterminer si le sérogroupe C est susceptible d’être groupé par des méthodes génétiques, mais ce problème a été minimisé par l’utilisation du typage PCR. Nous n’avons pas évalué l’immunité au sérogroupe C par sérologie. colonisation du pharynx Cette épidémie peut aussi ne pas avoir été aussi répandue que certaines épidémies associées au sérogroupe C. Les Centres américains de contrôle et de prévention des maladies recommandent des interventions lorsque le taux dépasse les cas par individu Ceci est souvent interprété par des analyses grossières sans stratification par Nous avons également évalué si une augmentation significative par âge était présente en utilisant la distribution de Poisson et avons constaté que le troisième cas se produisant dans la limite du mois était une aberration significative P & lt; Dans cette étude, la détection d’une souche de sérogroupe C associée à une éclosion chez des porteurs asymptomatiques était rare. Cette observation, associée à de faibles taux de portage et d’immunité et au risque de maladie invasive du sérogroupe C décrite ailleurs , souligne l’importance de immunisation contre la méningococcie du sérogroupe C une fois qu’un seuil épidémique a été franchi

Remerciements

Nous remercions M. John Chan, pour son assistance technique avec le PCR; M. Rick White, pour la surveillance statistique; et le Laboratoire national de médecine, Winnipeg, Manitoba, Canada, pour le sérosubgroupage et le typage électrophorétique des isolats d’indice

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